Caracterização de metáfases em linfócitos: comparação entre diferentes meios de cultura

Abstract

A análise dos cromossomas usando técnicas de citogenética permite a observação direta do genoma, sendo esta realizada através da observação das células que se encontram em metáfase. A qualidade da análise citogenética pode ser influenciada por diversos fatores, dos quais se destaca os tipos de meios de cultura utilizados. Com o intuito de analisar o número de metáfases obtido, a respetiva resolução das bandas e averiguar os custos associados à utilização de cada meio de cultura: Synchroset Chromossome Medium P, PB Max Karyotyping Medium, Pantum L24 e RPMI-1640, manualmente suplementado, foi realizado um estudo experimental em culturas sincronizadas de linfócitos T em diferentes meios de cultura provenientes de 21 amostras aleatórias de sangue periférico colhidos em heparina sódica, entre 11 a 25 de junho. A cada alíquota de 5mL de cada meio de cultura testado foi adicionado 0,5 mL de amostra de sangue periférico e incubadas a 37ºC durante 72 horas. A análise dos resultados demonstrou que o número de metáfases obtido (p=0,218; p=0,720; p=0,691) e a resolução dos cromossomas (p=0,983), determinada pelo método UKEQAS descrito pela Association for Clinical Cytogenetics, não se encontram dependentes dos meios de cultura utilizados, para valor de p<0,05. Adicionalmente, os meios de cultura completos apresentam custos por amostra superiores aos dos meios de cultura que necessitam de ser manualmente suplementados mesmo quando contabilizados os custos de todos os reagentes utilizados para a sua suplementação. Dessa forma, no âmbito da cultura celular, demonstrou-se ser possível reduzir custos, mantendo a qualidade da análise citogenética.